熒光原位雜交技術(shù)(Fluorescence
In Situ Hybridization,F(xiàn)ISH)利用核酸分子單鏈之間互補(bǔ)的堿基序列,通過標(biāo)記的核酸探針與目標(biāo)DNA或RNA進(jìn)行雜交,進(jìn)而定位和檢測特定DNA序列的技術(shù)。探針標(biāo)記可以采用熒光、地高辛或者生物素。FISH技術(shù)的基本原理是使用已知的標(biāo)記單鏈核酸作為探針,按照堿基互補(bǔ)的原則,與待檢材料中未知的單鏈核酸進(jìn)行雜交,形成可被檢測的雜交雙鏈核酸。由于DNA分子在染色體上是沿著染色體縱軸呈線性排列,因此可以通過探針直接與染色體進(jìn)行雜交,從而將特定的基因在染色體上定位。與傳統(tǒng)的放射性標(biāo)記原位雜交相比,F(xiàn)ISH技術(shù)具有快速、檢測信號(hào)強(qiáng)、雜交特異性高和可以多重染色等特點(diǎn)。該方法適用于植物染色體檢測、土壤(泥巴)中細(xì)菌檢測。
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植物雙分子熒光互補(bǔ)
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