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植物原位雜交除了在遺傳育種方面的應(yīng)用，還在其他領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用，包括：

植物基因表達(dá)模式研究：通過植物原位雜交技術(shù)可以檢測特定基因在不同組織或不同生長條件下的表達(dá)模式，有助于了解基因的功能和作用機(jī)制。

植物基因組研究：植物原位雜交技術(shù)可以用于基因組研究，例如染色體構(gòu)象、基因組變異和基因組進(jìn)化等方面，有助于深入了解植物基因組的特征和結(jié)構(gòu)。

組織原位雜交(Tissue in situ hybridization），即原位雜交組織化學(xué)技術(shù)和原位雜交細(xì)胞化學(xué)技術(shù)

原位雜交技術(shù)的基本原理

利用核酸分子單鏈之間有互補(bǔ)的堿基順序，通過堿基對之間非共價鍵的形成，出現(xiàn)穩(wěn)定的雙鏈區(qū)，形成雜交的雙鏈。

1.兩條核苷酸單鏈片段，GISH，在適宜的條件下，通過氫鍵結(jié)合，形成DNA-DNA、DNA一RNA或RNA一RNA雙鍵分子

2.應(yīng)用帶有標(biāo)記的（有性同位素，如3H、35S、32P，熒光素、生物素、等非性物質(zhì))DNA或RNA片段作為核酸探針，與組織切片或細(xì)胞內(nèi)待測核酸(RNA或DNA）片段進(jìn)行雜交

3.用自顯影等方法予以顯示，在光鏡或電鏡下觀察目的mRNA或DNA的存在與定位

用原位雜交術(shù)，可在原位研究細(xì)胞合成某種多肽或蛋白質(zhì)的基因表達(dá)。

此方法有很高的敏感性和特異性，可進(jìn)一步從分子水來探討細(xì)胞的功能表達(dá)及其調(diào)節(jié)機(jī)制。已成為當(dāng)今細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)研究的重要手段。

同一樣本可以多次做原位雜交實(shí)驗(yàn)嗎?

一般情況下，如果操作沒有得到理想的結(jié)果，是可以將探針洗滌然后進(jìn)行再次的雜交的。如果使用的是直標(biāo)型探針，還可以使用不同探針對同一樣本進(jìn)行反復(fù)雜交。針對不同的樣本，處理方法略有不同。

原位雜交實(shí)操中哪些因素比較重要?

重要的因素：溫度、光照、濕度和試劑的PH值。溫度和濕度直接影響著探針和目標(biāo)DNA的雜交效率；光照影響著熒光染料的強(qiáng)度，所以探針要避光保存，其已經(jīng)雜交的片子可用防熒光淬火劑封片且避光保存；各種試劑pH也要達(dá)到要求，這也直接關(guān)系到原位雜交的穩(wěn)定性。

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