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武漢科銳諾生物科技有限公司
主營：外泌體,透射電鏡,掃描電鏡,石蠟切片等技術(shù)服務(wù)
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原位雜交第二天
1.
1）將探針回收，放于－20C保存（通常探針可重復(fù)使用十次左右）。
2）加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升，60℃，放置30分鐘，重復(fù)一次。
3）置換2XSSCT1ml，60℃，分子病理技術(shù)服務(wù)，放置15分鐘。
4）置換0.2XSSCT1ml，60℃，放置30分鐘，重復(fù)一次。
2.
1）用MABT洗兩次，每次五分鐘，放在搖床輕輕搖動。
2）室溫下加1ml 1：2：7溶液，時(shí)間為一小時(shí)。
3）按1：3000的比例在1：2：7溶液中加入酶連，4C 冰箱過夜。
1、組織取材：組織取材應(yīng)盡可能新鮮。由于組織RNA降解較快，所以新鮮組織和培養(yǎng)細(xì)胞在30 min 內(nèi)固定。
2、細(xì)胞組織固定目的與注意事項(xiàng)：
（1）保持細(xì)胞結(jié)構(gòu)；
（2）大限度地保持細(xì)胞內(nèi)DNA或RNA的水平；
（3）使探針易于進(jìn)入細(xì)胞或組織。
常用的固定劑是多聚甲醛，與其它醛類固定劑不同，多聚甲醛不會與蛋白質(zhì)產(chǎn)生廣泛的交叉連接，因而不會影響探針穿透入細(xì)胞或組織。
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第4年
