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水稻原位雜交測試服務(wù)-科銳諾(推薦商家)

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后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液為1%多聚甲醛/0.1 M PBS（PH7.2-7.6），含有1/1000 DEPC。室溫固定 10分鐘。蒸餾水洗滌3次。

原位雜交的預(yù)雜交：濕盒的準(zhǔn)備——干的雜交盒底部加20%甘油20ml以保持濕度。按每張切片20μι加預(yù)雜交液。恒溫箱38-42℃2—4小時。吸取多余液體，不洗。

雜交——按每張切片20μι雜交液，加在切片上。將原位雜交專1用蓋玻片的保護(hù)膜揭開后，蓋在切片上。恒溫箱38-42℃雜交過夜(根據(jù)雜交情況可以調(diào)節(jié))。

雜交后洗滌：揭掉蓋玻片，37℃左右水溫的2×SSC洗滌5分鐘×2次；37℃0.5×SSC洗滌15分鐘×1次; 37℃0.2×SSC洗滌15分鐘×1次(如果有非特異性染色，水稻原位雜交測試服務(wù)，重復(fù)0.2×SSC洗滌15分鐘×1-2次)。

多彩色熒光原位雜交(multicolorfluorescenceinsituhybridization，mFISH)。它用幾種不同顏色的熒光素單獨(dú)或者混合標(biāo)記的探針進(jìn)行原位雜交，能同時檢測多個基因，擴(kuò)大了FISH技術(shù)的臨床應(yīng)用。FISH技術(shù)目前主要應(yīng)用于染色體和DNA水平上的病理診斷檢測。染色體FISH主要檢測染色體易位、缺失、重復(fù)、變異等;DNAFISH主要是檢測基因突變、擴(kuò)增、易位、缺失。與原位雜交技術(shù)相比，F(xiàn)ISH更加安全、快速，特異性好、定位準(zhǔn)確。

熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization，F(xiàn)ISH）是在20世紀(jì)80年代末在性原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種非性分子細(xì)胞遺傳技術(shù)，以熒光標(biāo)記取代同位素標(biāo)記而形成的一種新的原位雜交方法，探針首先與某種介導(dǎo)分子（reporter molecule）結(jié)合，雜交后再通過細(xì)胞化學(xué)過程連接上熒光染料[1，2].FISH的基本原理是將DNA（或RNA）探針用特殊的核苷酸分子標(biāo)記，然后將探針直接雜交到染色體或DNA纖維切片上，再用與熒光素分子偶聯(lián)的單與探針分子特異性結(jié)合來檢測DNA序列在染色體或DNA纖維切片上的定性、定位、相對定量分析.FISH具有安全、快速、靈敏度高、探針能長期保存、能同時顯示多種顏色等優(yōu)點(diǎn)，不但能顯示中期分裂相，還能顯示于間期核.同時在熒光原位雜交基礎(chǔ)上又發(fā)展了多彩色熒光原位雜交技術(shù)和染色質(zhì)纖維熒光原位雜交技術(shù).

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