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植物亞細(xì)胞定位-貝科新肽(在線咨詢)

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除了洋蔥亞細(xì)胞定位，還有許多其他亞細(xì)胞定位方法。其中，比較常見的有：

熒光法：將學(xué)方法與熒光標(biāo)記技術(shù)結(jié)合起來研究特異蛋白抗原在細(xì)胞內(nèi)分布的方法。由于熒光素所發(fā)的熒光可在熒光顯微鏡下檢出，從而可對抗原進(jìn)行細(xì)胞定位。用熒光技術(shù)顯示和檢查細(xì)胞或組織內(nèi)抗原或半抗原物質(zhì)等也稱為熒光細(xì)胞(或組織)化學(xué)技術(shù)。

GFP融合蛋白表達(dá)法：將目的蛋白與綠色熒光蛋白(GFP)融合，通過熒光顯微鏡觀察綠色熒光蛋白的表達(dá)位置。

亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)分離定位法。

細(xì)胞膜及內(nèi)膜系統(tǒng)相關(guān)的協(xié)同作用

黏著斑激酶（FAK）定位于細(xì)胞質(zhì)黏著斑、細(xì)胞核和內(nèi)體中。在細(xì)胞質(zhì)黏著斑中，F(xiàn)AK 通過調(diào)控細(xì)胞黏著斑的解聚與組裝及多個蛋白質(zhì)的磷酸化從而調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖和遷移。在內(nèi)體中，F(xiàn)AK 通過 FERM 結(jié)構(gòu)域定位到內(nèi)體并被。內(nèi)體中整合素的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)時間比質(zhì)膜上持續(xù)的時間更長，并且能夠阻止腫1瘤細(xì)胞發(fā)生失巢凋亡，因此，植物亞細(xì)胞定位，內(nèi)體 FAK 可通過抵抗失巢凋亡促進(jìn)腫1瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。而在細(xì)胞核中，F(xiàn)AK 可導(dǎo)致 p53 的多聚泛素化及降解，從而影響正常細(xì)胞的存活和腫1瘤細(xì)胞的生長。此外，核 FAK 還能夠通過調(diào)節(jié)細(xì)胞的因子和趨化因子的表達(dá)促進(jìn)腫1瘤免疫逃逸的發(fā)生。這表明 FAK 在不同亞細(xì)胞定位下，與不同的蛋白質(zhì)協(xié)同作用，共同調(diào)控腫1瘤的發(fā)生和發(fā)展。

GFP是綠色熒光蛋白，在掃描共聚焦顯微鏡的激光照射下會發(fā)出綠色熒光，從而可以地定位蛋白質(zhì)的位置。綠色螢光蛋白（GFP）是一個由約238個氨基酸組成的蛋白質(zhì)，從藍(lán)光到紫外線都能使其激發(fā)，發(fā)出綠色熒光。通過基因工程技術(shù)，綠色螢光蛋白(GFP)基因能轉(zhuǎn)進(jìn)不同物種的基因組，在后代中持續(xù)表達(dá)，并且能根據(jù)啟動子特異性地表達(dá)。

使用GFP必須構(gòu)建融合蛋白載體，并在轉(zhuǎn)染之后有效表達(dá)。這樣，若在熒光顯微鏡下看到細(xì)胞內(nèi)某一部位存在GFP信號，說明和GFP融合的蛋白也存在于該部位，這樣就達(dá)到了確定某物質(zhì)亞細(xì)胞定位的目的。

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